01 什么是細(xì)胞傳代？
隨著細(xì)胞不斷生長(zhǎng)，培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞數(shù)量會(huì)逐漸增加。當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度后：
營(yíng)養(yǎng)會(huì)逐漸不足
代謝廢物開始累積
細(xì)胞之間空間不足
此時(shí)，如果繼續(xù)培養(yǎng)，就容易導(dǎo)致：
生長(zhǎng)速度下降
細(xì)胞狀態(tài)變差
甚至出現(xiàn)死亡或分化異常
因此，需要將部分細(xì)胞轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)環(huán)境中繼續(xù)培養(yǎng)，
這一過程就稱為——
細(xì)胞傳代
簡(jiǎn)單來說：?? 就是給細(xì)胞“換一個(gè)更寬敞的新環(huán)境”。
02貼壁細(xì)胞為什么需要“消化”
對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，細(xì)胞會(huì)牢固附著在培養(yǎng)表面。
因此在傳代前，需要先讓細(xì)胞從培養(yǎng)表面脫離。
實(shí)驗(yàn)中通常會(huì)使用：胰酶（Trypsin）或其他細(xì)胞消化液對(duì)細(xì)胞進(jìn)行短時(shí)間處理。
這一過程稱為：
細(xì)胞消化
很多新手最容易出現(xiàn)的問題就是：
?? “消化過度”。
如果消化時(shí)間過長(zhǎng)，可能導(dǎo)致：
細(xì)胞膜受損
貼壁能力下降
細(xì)胞活率降低
因此，在顯微鏡下觀察到：
細(xì)胞邊緣變圓
細(xì)胞開始脫落
通常就需要及時(shí)終止消化。
03 細(xì)胞傳代的基礎(chǔ)流程
一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的貼壁細(xì)胞傳代流程通常包括：
1? 觀察細(xì)胞狀態(tài)
確認(rèn)：
細(xì)胞密度是否合適
是否存在污染
細(xì)胞形態(tài)是否正常
通常建議在：
?? 70%–90%融合度 時(shí)進(jìn)行傳代。
2? 吸除舊培養(yǎng)基
去除培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的代謝廢物。
3? PBS清洗
用于去除殘留血清，避免影響后續(xù)消化效果。
4? 加入消化液
使貼壁細(xì)胞逐漸脫離培養(yǎng)表面。
5? 終止消化并重懸細(xì)胞
加入含血清培養(yǎng)基終止消化，輕柔吹打重懸。
6?低速離心去除上清
用新鮮培養(yǎng)基重懸
7?按比例接種至新培養(yǎng)器皿根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行分瓶或擴(kuò)增培養(yǎng)。
特別提醒：實(shí)驗(yàn)中新手傳代最容易踩的坑
? 吹打過猛
容易造成機(jī)械損傷。
? 消化不足或過度
都會(huì)影響后續(xù)貼壁與增殖。
? 細(xì)胞密度控制不合理
過稀或過密都可能導(dǎo)致狀態(tài)波動(dòng)。
? 忽視培養(yǎng)表面穩(wěn)定性
對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，培養(yǎng)表面直接影響：
細(xì)胞附著
鋪展
生長(zhǎng)狀態(tài)
因此，穩(wěn)定的培養(yǎng)耗材非常重要。
04 耐思在細(xì)胞傳代中的產(chǎn)品支持
圍繞細(xì)胞培養(yǎng)的常見應(yīng)用場(chǎng)景，耐思提供多種穩(wěn)定、可控的一次性耗材解決方案：
細(xì)胞培養(yǎng)瓶 / 培養(yǎng)板
高透明度，便于觀察細(xì)胞形態(tài)與貼壁狀態(tài)
穩(wěn)定的表面性能，支持貼壁細(xì)胞培養(yǎng)需求
針對(duì)貼壁細(xì)胞培養(yǎng)需求，耐思細(xì)胞培養(yǎng)類耗材提供 TC 處理與未 TC 處理 兩種規(guī)格，可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景靈活選購。TC（Tissue Culture）表面處理通過對(duì)高品質(zhì)聚苯乙烯（PS）基材表面進(jìn)行受控改性，從而增強(qiáng)細(xì)胞附著能力，促進(jìn)貼壁細(xì)胞快速鋪展與穩(wěn)定生長(zhǎng)。
離心管 / 凍存管
良好密封性，降低細(xì)胞轉(zhuǎn)移與儲(chǔ)存過程中的風(fēng)險(xiǎn)
適用于細(xì)胞收集、凍存及復(fù)蘇等基礎(chǔ)操作
血清移液管 / 吸頭
內(nèi)壁光滑，液體殘留少
超強(qiáng)疏水性、超低吸附性
幫助降低人為操作帶來的不確定因素
產(chǎn)品細(xì)胞培養(yǎng)類耗材均保證：
無細(xì)胞毒性、
無 DNA、無 DNase/RNase
